微量熱泳動（MST）分子相互作用分析儀

德國 NanoTemper 公司于2010年推出的Monolith系列微量熱泳動儀，提供了一種簡捷、快速分析生物分子相互作用的方法。Monolith系列微量熱泳動儀，可在溶液中測定生物分子間相互作用，小到離子，大到病毒顆粒，10分鐘即可獲得親和力數據。已有600家高校、科研機構和企業使用Monolith系列微量熱泳動儀進行生物分子相互作用研究，發表文獻超過2000篇。

微量熱泳動（MST）分子相互作用分析儀?：

1. 迅速獲得試驗結果：10 分鐘之內完成親和力測定；
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3. 適用于所有類型樣品：不受樣品大小和分子量限制；

4. 樣品準備簡單：溶液中直接測定，無需表面固定；

5. 樣品用量極少：測定Kd值僅需要數ng樣品；

6. 無需蛋白純化：熒光融合蛋白可無需純化，直接在裂解液中進行試驗；

7. 試驗優化方便：數據直接體現樣品性質；

微量熱泳動（MST）分子相互作用分析儀?  Monolith NT.115主要參數：

1. 可測定樣品類型：離子、化合物、核酸、多肽、蛋白、糖類、脂質體、納米顆粒、病毒等；
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3. 測定親和力（KD值）范圍：1 pM – mM；
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5. 測定樣品的分子量范圍：10¹ - 10⁷ Da；
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7. 獲得親和力所需要的蛋白樣品量小于0.5 μg；
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9. 一次可測定的樣品數量：16個；
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11. 每個樣品所需體積：4 μL；
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13. 獲得親和力所需要的測定時間：10 min；
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15. 對測定緩沖液沒有限制，包括但不限于含去垢劑的緩沖液、含DMSO（0-100%）等有機溶劑的緩沖液、細胞裂解液、上清液、血清、血漿、組織勻漿等。
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17. 除測定親和力外，還可測定化學計量數，即生物分子結合位點的數目；熱力學參數：ΔG (自由能 )、ΔH (焓)、ΔS (熵)；進行競爭性試驗，獲得Ki；區分多次結合，分別計算多個結合位點的親和力；測定蛋白寡聚化的親和力和動力學；
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19. 儀器無需預熱可直接開機使用，實驗完成后不需要對儀器進行清洗維護；
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檢測原理：

微量熱泳動（MST） 是一種定量分析生物分子間相互作用的有效方法。它檢測分子在微觀溫度梯度場中的運動，探測其水化層、電荷以及分子大小的變化。MST將熒光檢測與熱泳動的靈活性及靈敏度結合起來，快速、可信地檢測分子間相互作用。MST 測試時，由紅外激光建立微觀溫度梯度場，通過熒光染料標記、熒光融合蛋白、色氨酸自發熒光等信號追蹤，分子在微觀溫度梯度場中的定向移動就可以被探測和量化。

參考文獻：

Cell : "Multivalent Small-Molecule Pan-RAS Inhibitors." Matthew E. W., et al.  Cell, 2017, 168, 878-889

Science : "Precursor processing for plant peptide hormone maturation by subtilisin-like serine proteinases." Katharina S., et al. Science 2016, 354, 1594-1597

Science : "Competition between MPS1 and microtubules at kinetochores regulates spindle checkpoint signaling." Yoshitaka H., et al. Science 2015, 348, 1264-1267

Nature : “Molecular basis of nitrate uptake by the plant nitrate transporter NRT1.1.”Parker and Newstead, Nature, 2014, 507, 68-72